本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)黃曲霉毒素B1的化學(xué)發(fā)光免疫分析測(cè)定試劑盒,所述試劑盒包括黃曲霉毒素B1校準(zhǔn)液,固體載體,酶標(biāo)記結(jié)合物,化學(xué)發(fā)光底物液A、B,及濃縮洗滌液,其中,所述固體載體為微孔板,且所述微孔板由黃曲霉毒素B1單克隆抗體包被,所述酶標(biāo)記結(jié)合物是辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素B1完全抗原,所述化學(xué)發(fā)光底物液A含魯米諾或異魯米諾。本發(fā)明還公開(kāi)了一種黃曲霉毒素B1的化學(xué)發(fā)光免疫分析測(cè)定試劑盒的制備方法及檢測(cè)黃曲霉毒素B1的方法。使用本發(fā)明制備的試劑盒檢測(cè)黃曲霉毒素B1,具有操作簡(jiǎn)便,靈敏度高,特異性好,高效、線性范圍寬,與病原學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果符合度極高等特點(diǎn),為把好食物及飼料入口關(guān)提供保證。