提供了一種將蟲熒光素酶與一種化學本體結(jié)合 的方法，具體地是與一類特異的結(jié)合劑如抗體，抗原或核酸，以 及更具體地說是一種抗體結(jié)合的方法，它包括(a)將蟲熒光素酶 與一種或多種D-蟲熒光素，鎂離子和腺苷三磷酸混合以及(b) 用共價偶聯(lián)劑在蟲熒光素酶和結(jié)合劑之間進行共價偶聯(lián)反應(yīng)， 其中D-蟲熒光素，鎂離子和/或腺苷三磷酸的量足以保護蟲熒 光素酶的活性免受共價偶聯(lián)劑的抑制。優(yōu)選步驟(a)的操作是 將蟲熒光素酶與其底物在溶液中混合并優(yōu)選鎂和腺苷三磷酸 二者以腺苷三磷酸鎂的形式存在(Mg2+ATP)，可選擇地與D- 蟲熒光素一起使用。本發(fā)明第二個方面由本發(fā)明的方法提供了 一種包含與活性蟲熒光素酶結(jié)合的化學本體的標記的化學本 體。優(yōu)選化學本體是一種適于特異的結(jié)合測試應(yīng)用的結(jié)合劑， 優(yōu)選是抗體、抗原或核酸。當結(jié)合劑是核酸時，優(yōu)選寡核苷酸， 但可以是多核苷酸或單個核苷酸，并且可被用做雜交探針或鏈 延伸引物，例如PCR引物。最好本體是一種以前曾試圖用于與 蟲熒光素酶偶聯(lián)，但結(jié)果卻是無活性的抗體。另外還提供了檢 測試劑盒。