本發(fā)明公開了一種高靈敏快速篩查內分泌干擾物的試劑盒及方法，包含NR?LBD蛋白溶液、磁性微球?NCoA?BAP?BamH I交聯(lián)聚合蛋白溶液、特異性雙標記熒光探針和反應液。本發(fā)明首先將NR?LBD蛋白溶液、活化的磁性微球?NCoA?BAP?BamH I交聯(lián)聚合蛋白溶液和適量體積的待測物質共同孵育，然后磁性分離清洗所述檢測體系，再加入特異性雙標記熒光探針，利用熒光定量PCR儀擴增檢測熒光強度，最后通過軟件計算得出待測物質的EC50或IC50。本發(fā)明所提供的試劑盒及檢測方法操作簡單、檢測時長短、靈敏度高、重復性好，測試通量大，可廣泛應用于大批量化學品內分泌干擾活性的快速檢測。