本發(fā)明屬于基因工程領(lǐng)域，涉及一種新型嗜鹽古菌胞外蛋白酶的制備方法及其應(yīng)用；步驟為：首先基于嗜鹽古菌DYF 46的基因組獲得編碼基因hly；通過(guò)分子克隆技術(shù)將hly連接到載體上構(gòu)建重組質(zhì)粒；將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化原核生物宿主，得到轉(zhuǎn)化后的重組宿主細(xì)胞在含有卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，經(jīng)培養(yǎng)、誘導(dǎo)表達(dá)后低溫離心收集菌體，于細(xì)胞裂解液中進(jìn)行重懸，經(jīng)超聲破碎、離心收集上清液，用于重組蛋白純化；采用鎳親和層析純化蛋白結(jié)合柱上復(fù)性方法獲得成熟酶，經(jīng)凝膠過(guò)濾層析純化后獲得高純度Hly。本發(fā)明得到的Hly具有優(yōu)良的酶學(xué)特性，可應(yīng)用于洗滌劑、廢水處理、制藥和環(huán)境修復(fù)等復(fù)雜、含鹽的降解蛋白質(zhì)的生產(chǎn)加工過(guò)程中。