基于熒光定量PCR技術(shù)的快速檢測(cè)大腸桿菌含量的方法。本發(fā)明以大腸桿菌LacZ基因?yàn)闄z測(cè)靶基因，通過化學(xué)合成方法合成得到一定質(zhì)量的具有多個(gè)核苷酸的標(biāo)準(zhǔn)靶序列，將一定質(zhì)量的靶序列所含分子數(shù)量，定量后稀釋得到LacZ基因系列濃度標(biāo)準(zhǔn)品，以LacZ基因系列濃度標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品DNA為模板，利用特異性引物進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測(cè)樣品的Ct值判定結(jié)果。同時(shí)，根據(jù)大腸桿菌LacZ基因特異性片段序列設(shè)計(jì)并合成一組特異性引物，優(yōu)化PCR反應(yīng)條件，建立以實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)為平臺(tái)的檢測(cè)方法，并對(duì)所建立的方法進(jìn)行評(píng)估。