本發(fā)明公開了一種對可溶性抗體進行純化的方法。具體步驟為:首先將優(yōu)化條件下誘導(dǎo)表達的600mL菌液離心后收集菌體,PBS重懸超聲裂解(80W,30min),離心收集裂菌上清,經(jīng)ProteinL柱純化,10%SDS-PAGE監(jiān)測純化的效果;10%SDS-PAGE分離純化的抗人大腸癌P-gp21Fab抗體,電轉(zhuǎn)至PVDF膜;以HRP標(biāo)記的山羊抗鼠IgG抗體震蕩孵育后;ECL化學(xué)發(fā)光顯影,定影;同時將人大腸癌P-gp21經(jīng)10%SDS-PAGE電泳,電轉(zhuǎn)至NC膜;純化的Fab抗體作一抗,AP標(biāo)記的馬抗小鼠IgG抗體為二抗,BCIP/NBT顯色。陰性對照為pComb3裂菌上清,陽性對照為抗Histag抗體。本發(fā)明的有益效果是,實驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,可以定性、定量分析,同時為后續(xù)展開的人源化提供依據(jù)和支持。
聲明:
“對可溶性抗體進行純化的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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