本發(fā)明公開了一種使用家蠶制備鎮(zhèn)痛活性多肽的方法,屬于基因工程領(lǐng)域。所述制備方法如下:根據(jù)家蠶核型多角體病毒(BmNPV)密碼子使用頻率優(yōu)化芋螺毒素ω-MVIIA基因序列,經(jīng)化學(xué)合成后連入供體質(zhì)粒pFastBacDual,再引入綠色熒光蛋白(EGFP)基因,構(gòu)建重組供體質(zhì)粒pFBD-MVIIA/EGFP。使用Bac-to-Bac方法將MVIIA/EGFP轉(zhuǎn)座到BmNPV,形成重組病毒vBmMVIIA/EGFP。將重組病毒DNA轉(zhuǎn)染至家蠶細(xì)胞,獲得BV粒子,借助綠色熒光測定BV粒子滴度后,以200?pfu的BV粒子注射家蠶,感染5天后,收獲家蠶血液。通過小鼠醋酸扭體試驗證實,表達(dá)芋螺毒素ω-MVIIA的受感染家蠶的血液具有顯著的鎮(zhèn)痛活性,平均扭體次數(shù)僅3.55次,明顯高于注射生理鹽水的對照組(37.30次)。本發(fā)明為表達(dá)具有鎮(zhèn)痛活性的芋螺毒素ω-MVIIA提供了新的方法,具有潛在的應(yīng)用價值。
聲明:
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