本發(fā)明涉及一種基于口蹄疫病毒3B表位蛋白的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒，屬于免疫學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，所述試劑盒包括化學(xué)發(fā)光反應(yīng)板、酶標(biāo)抗體、血清稀釋液、化學(xué)發(fā)光底物和化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑，其中化學(xué)發(fā)光反應(yīng)板混合包被口蹄疫病毒3B非結(jié)構(gòu)蛋白區(qū)域中的3Bepi1和3Bepi2兩種表位蛋白，兩種蛋白的包被條件均為25ng/孔，編碼表位蛋白的基因是經(jīng)引物直接退火形成，而引物的組成包括各表位序列和限制性酶切位點(diǎn)。所述試劑盒的檢測(cè)方法在檢測(cè)待檢血清時(shí)用時(shí)較短，不到15min便可檢測(cè)完畢，所述試劑盒基于3B的表位蛋白制備，具有良好的免疫反應(yīng)性和特異性，能夠較好地區(qū)分免疫和感染的動(dòng)物，準(zhǔn)確率高達(dá)97.14%，具有很好的應(yīng)用前景。