本發(fā)明公開了一種基于雙標(biāo)記擴(kuò)增的血漿循環(huán)甲基化DNA
電化學(xué)檢測方法,屬于甲基化DNA檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明使用不同標(biāo)記(地高辛,生物素)的甲基化特異性引物,通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)鑒別亞硫酸氫鹽修飾的基因組樣品中的甲基化DNA而不是非甲基化等位基因;利用聚合酶的擴(kuò)增能力,產(chǎn)生大量具有地高辛和生物素雙標(biāo)記的雙鏈擴(kuò)增子;通過修飾在金電極表面的地高辛抗體捕獲這些雙鏈擴(kuò)增子;然后通過生物素?親和素結(jié)合作用捕獲辣根過氧化物酶綴合的抗生物素蛋白(Avidin?HRP),利用酶的催化過程產(chǎn)生電化學(xué)信號。該方法具有良好的靈敏度,能檢測5pg的甲基化DNA分子,同時具有良好的特異性,能夠在有大量非甲基化DNA干擾下檢測出1%的甲基化DNA。
聲明:
“基于雙標(biāo)記擴(kuò)增的血漿循環(huán)甲基化DNA電化學(xué)檢測方法及試劑盒” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)