本發(fā)明涉及一種基于示蹤分子的蛋白質(zhì)-微球化學(xué)偶聯(lián)效率的檢測(cè)方法，包括如下步驟：(1)將蛋白質(zhì)與外源性示蹤分子按照一定質(zhì)量比或者摩爾比混合；(2)在特定偶聯(lián)反應(yīng)條件下，將羧基化聚苯乙烯微球與蛋白質(zhì)-外源性示蹤分子溶液進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)；并通過(guò)改變偶聯(lián)反應(yīng)條件以及使用不同濃度的蛋白質(zhì)-外源性示蹤分子溶液，對(duì)化學(xué)偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的優(yōu)化；(3)對(duì)羧基化聚苯乙烯微球表面的外源性示蹤分子進(jìn)行定量。本發(fā)明通過(guò)向氨基-羧基的偶聯(lián)反應(yīng)中加入少量的外源性示蹤分子，并對(duì)其進(jìn)行跟蹤，可以有效地監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)與聚苯乙烯微球之間化學(xué)偶聯(lián)的效率。該方法可以迅速、合理、有效地監(jiān)測(cè)偶聯(lián)反應(yīng)。