本發(fā)明涉及醫(yī)療診斷技術領域，公開了一種白介素?6化學發(fā)光測定試劑盒及其制備方法。本發(fā)明所述試劑盒包括白介素?6抗體A偶聯(lián)的超順磁微粒工作液、酶標白介素?6抗體B工作液和化學發(fā)光底物液。其中，所述酶標白介素?6抗體B由經(jīng)過Traut’s Reagent活化后的酶與經(jīng)過Sulfo?SMCC活化后的白介素?6抗體B偶聯(lián)獲得。本發(fā)明以Traut’s Reagent和Sulfo?SMCC為“橋梁”，將堿性磷酸酶和白介素?6抗體進行標記，相對于常規(guī)的EDC?NHS酶標記獲得的酶標抗體，本發(fā)明方案能夠顯著提高白介素?6檢測試劑盒的靈敏度，可以應用于化學發(fā)光免疫分析檢測試劑盒中。