本發(fā)明公開了一種基于金納米團(tuán)簇/MnO₂納米花的電化學(xué)發(fā)光傳感器的制備及對(duì)前列腺抗原(PSA)和Let?7a miRNA的檢測(cè)應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案是利用電化學(xué)發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(ECL?RET)技術(shù)，制備了電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器，通過“off?on”檢測(cè)模式，實(shí)現(xiàn)了對(duì)前列腺抗原和Let?7a miRNA的靈敏分析。首先采用金納米團(tuán)簇(Met?Au NCs)修飾電極，構(gòu)建了Met?AuNCs ECL供體與Au?MnO₂納米花受體之間的高效ECL?RET系統(tǒng)，制備了一種信號(hào)“off”的ECL免疫傳感器檢測(cè)PSA。然后，Let?7a miRNA(目標(biāo)二)觸發(fā)滾環(huán)放大(RCA)反應(yīng)產(chǎn)生長DNA納米線，該納米線可以連接大量生物素?鏈霉親和素結(jié)構(gòu)，標(biāo)記大量堿性磷酸酶(ALP)，ALP催化L?抗壞血酸?2?磷酸三鈉(AAP)原位產(chǎn)生大量抗壞血酸(AA)。AA將MnO₂還原為Mn²⁺，抑制了MnO₂對(duì)Met?AuNCs ECL的猝滅，并獲得明顯的ECL信號(hào)“ON”狀態(tài)，用于Let?7a檢測(cè)。