本發(fā)明屬于分析化學領(lǐng)域,具體涉及一種高效液相色譜法分離檢測左亞葉酸鈣中間體及相關(guān)物質(zhì)的方法,該方法采用的色譜柱是以辛烷基鍵合硅膠為填料,采用乙酸銨緩沖溶液和有機溶液進行梯度洗脫,將左亞葉酸鈣中間體及相關(guān)物質(zhì)進行分離,通入檢測器進行檢測;相關(guān)物質(zhì)為雜質(zhì)A、雜質(zhì)C、雜質(zhì)G、對甲苯磺酸、雜質(zhì)Z1b、雜質(zhì)Z1d?1、雜質(zhì)Z1d?2、雜質(zhì)SM1f、雜質(zhì)SM1g、雜質(zhì)SM1i、雜質(zhì)SM1j;流動相流速為0.8~1.2ml/min;色譜柱柱溫為35~45℃;檢測器波長為280±10nm;該方法能同時對左亞葉酸鈣中間體及11個物質(zhì)進行檢測,本品中對甲苯磺酸對雜質(zhì)檢測沒有干擾,用面積歸一化法即可進行計算,方法簡單、快速、有效。
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