本發(fā)明公開了一種可用比率法檢測過氧亞硝酸根的磷光聚合物探針及其制備方法和應用，該磷光聚合物探針是由兩種磷光銥配合物(Ir1、Ir2)和水溶性聚合物共聚而成，其中，磷光銥配合物Ir1作為惰性的磷光內(nèi)參單元，對過氧亞硝酸根不響應；磷光銥配合物Ir2作為磷光響應單元，能夠與過氧亞硝酸根發(fā)生化學反應，實現(xiàn)對過氧亞硝酸根的特異性響應；水溶性聚合物作為聚合物的主鏈構(gòu)成單元，賦予聚合物良好的水溶性和生物相容性；該磷光聚合物探針P?ONOO可用于水溶液中、活細胞內(nèi)及活體內(nèi)的過氧亞硝酸根的比率法檢測及成像，在生物成像與傳感方面具有重要的應用前景。