本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。基因的異常甲基化參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展,本發(fā)明的目的在于克服甲基化敏感性限制性內(nèi)切酶法、重亞硫酸鹽測(cè)序法和甲基化特異性PCR法的缺點(diǎn),提供一種操作簡(jiǎn)便、敏感性高的PAPOLB基因甲基化定量檢測(cè)方法。本發(fā)明取胰腺癌組織,提取DNA制備ACTB的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,利用全甲基化模板,制備PAPOLB的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品;提取待測(cè)組織DNA,并進(jìn)行化學(xué)修飾,針對(duì)人PAPOLB基因啟動(dòng)子區(qū)CPG島設(shè)計(jì)甲基化引物及探針,針對(duì)人參照基因ACTB啟動(dòng)子區(qū)CPG島設(shè)計(jì)BSP引物及探針,采用Taqman-MGB實(shí)時(shí)定量PCR方法對(duì)亞硫酸鹽處理后的DNA進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR,計(jì)算出PAPOLB基因甲基化程度的定量值。本發(fā)明方法快速、準(zhǔn)確、靈敏度高。