本發(fā)明提供了一種重組融合hACE2?SEAP蛋白及其制備方法和應(yīng)用，所述重組融合hACE2?SEAP蛋白由連接肽將hACE2蛋白和SEAP蛋白的氨基酸序列連接而成，本發(fā)明還提供了一種重組融合hACE2?SEAP蛋白表達(dá)載體及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的重組融合hACE2?SEAP蛋白可以與SARS?COV?2的S1抗原特異性高效結(jié)合，并在體外穩(wěn)定表達(dá)；其避免了傳統(tǒng)標(biāo)記所產(chǎn)生的游離hACE2和SEAP，減少檢測非特異性；同時具有AP催化活性直接使底物發(fā)光，省略了標(biāo)記物的標(biāo)記過程，避免了傳統(tǒng)標(biāo)記的批間差異；省卻了重組融合hACE2?SEAP蛋白的純化制備過程，降低了生產(chǎn)成本；節(jié)省了化學(xué)發(fā)光法檢測SARS?COV?2中和抗體的操作步驟和時間，可以在制備冠狀病毒檢測試劑盒中應(yīng)用，適合應(yīng)用于大規(guī)模臨床檢測。