本發(fā)明公開了一種有效表達(dá)色氨酸合成酶的新型表達(dá)載體及其應(yīng)用，其表達(dá)載體構(gòu)建步驟為：一、以大腸桿菌K?12為模板PCR擴(kuò)增trpBA基因，純化后連接到pCold?I載體上，得到重組質(zhì)粒trpBA?pCold?I，二、設(shè)計(jì)引物P_敲除lacO?F/P_敲除lacO?R，以trpBA?pCold?I質(zhì)粒為模板進(jìn)行全質(zhì)粒PCR，產(chǎn)物經(jīng)Dpn?I處理后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，再進(jìn)行質(zhì)粒擴(kuò)增、培養(yǎng)、測(cè)序，得到敲除lacO序列的新重組質(zhì)粒，再對(duì)新重組質(zhì)粒的cspA啟動(dòng)子進(jìn)行隨機(jī)突變并轉(zhuǎn)化大腸桿菌經(jīng)擴(kuò)增、培養(yǎng)、測(cè)序、篩選得到有效表達(dá)色氨酸合成酶的新型表達(dá)載體。該方法能夠避免化學(xué)誘導(dǎo)劑的使用，不需要調(diào)整發(fā)酵溫度，從而有效降低色氨酸合成酶的生產(chǎn)成本，且為進(jìn)一步研究啟動(dòng)子對(duì)基因表達(dá)的影響提供了理論基礎(chǔ)。