本發(fā)明提供一種用于溶酶體超分辨熒光成像的自閃熒光染料及其合成方法與應(yīng)用。該熒光染料以羅丹明600為熒光團(tuán)母體，在2’位引入2?氨基?6甲基吡啶基團(tuán)進(jìn)行螺酰胺化修飾，設(shè)計(jì)合成了一種新型溶酶體超分辨自閃熒光染料—LysoSR?600，其結(jié)構(gòu)式如(1)所示，該染料具有良好的熒光開關(guān)性能，在pH>4的水溶液中均以閉環(huán)結(jié)構(gòu)(暗態(tài))存在，使得其在溶酶體中存在少量的開環(huán)結(jié)構(gòu)(熒光態(tài))，在溶酶體中存在的熒光態(tài)與暗態(tài)的不斷變化使其具有自閃性能。該染料實(shí)現(xiàn)了對(duì)溶酶體的精準(zhǔn)定位，并且能夠?qū)θ苊阁w進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的動(dòng)態(tài)超分辨熒光成像，以及對(duì)溶酶體的大小、分布、pH等進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，在溶酶體相關(guān)生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有著十分廣闊的應(yīng)用前景。