本發(fā)明公開了一種無飼養(yǎng)層人多能干細胞培養(yǎng)基，含有如下組分：L-抗壞血酸-2磷酸鎂、亞硒酸鈉、重組人胰島素、人脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白、堿性成纖維細胞生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子beta1、肝素鋰和/或肝素鈉、DMEM/F-12基礎培養(yǎng)基及滲透壓調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明的培養(yǎng)基在低密度和普通密度進行hiPSC培養(yǎng)時，增殖速度高，細胞形態(tài)和多能性維持的好，不需要使用昂貴的硫酸乙酰肝素，極大的降低了成本，并且能夠滿足現(xiàn)階段幾乎所有的hiPSC維持培養(yǎng)，以及加入各小分子化合物進行誘導重編程培養(yǎng)（去除TGFB1和DM），因此該培養(yǎng)基將適合各基礎科研、臨床科研實驗的廣泛研究。