本發(fā)明公開了一種25?羥基維生素D化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒及其制備方法，25?羥基維生素D化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒包括：25?羥基維生素D單克隆抗體包被的羧基化的磁微粒和維生素D衍生物標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物。這種25?羥基維生素D化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒能夠以全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為檢測工具，完成25?羥基維生素D的檢測這種25?羥基維生素D化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒，經(jīng)過實驗，其檢測靈敏度達(dá)到0.2ng/mL，相對于傳統(tǒng)的25?羥基維生素D的檢測方法靈敏度至少提高了10倍，這種25?羥基維生素D化學(xué)發(fā)光免疫檢測試劑盒的檢測精度較高。