本發(fā)明公開一種基于指數(shù)級(jí)非酶擴(kuò)增及電化學(xué)發(fā)光原理的microRNA痕量檢測(cè)方法。本發(fā)明采用非酶擴(kuò)增及雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系，針對(duì)檢測(cè)目標(biāo)microRNA序列設(shè)計(jì)特異性的DNA發(fā)卡探針H1、H2、H3、H4序列；當(dāng)擴(kuò)增體系中含有待測(cè)microRNA，由H1+H2雙鏈復(fù)合結(jié)構(gòu)觸發(fā)后續(xù)的雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)過(guò)程，雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)過(guò)程由H3和H4共同完成；經(jīng)鏈霉親和素磁珠捕捉，將擴(kuò)增產(chǎn)物捕捉，并由電化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)產(chǎn)生并檢測(cè)電化學(xué)發(fā)光信號(hào)。該方法全過(guò)程不需要酶的參與，原理簡(jiǎn)單且檢測(cè)成本低；具有恒溫?cái)U(kuò)增、高靈敏度、操作簡(jiǎn)單、易于普及等優(yōu)點(diǎn)。該方法適用于核酸檢測(cè)，也可以結(jié)合蛋白適配體相關(guān)技術(shù)用于蛋白檢測(cè)。