本發(fā)明屬于生化分析檢測技術領域，具體為溶酶體內酸性水解酶活性的檢測方法和檢測試劑盒。本發(fā)明首先設計包含5種溶酶體內粘多糖酸性水解酶的檢測系統(tǒng)，這五種酶分別為：α?L?艾杜糖苷酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、β?N?乙酰半乳糖胺?6?硫酸酯酶、β?半乳糖苷酶和芳基硫酸酯酶B酶。本發(fā)明利用4甲基傘形酮具有熒光的特性，使用化學合成獲得的4甲基傘形酮基團與酶底物結合產生的新底物，采用含有新底物的酸性緩沖溶液與粘多糖水解酶進行反應，水解酶水解底物后釋放出游離的4甲基傘形酮熒光物質。樣本中水解酶的活性越高，水解底物釋放的4甲基傘形酮的量越多，通過熒光檢測產生的熒光強度也越高，從而實現(xiàn)對水解酶活性的定量檢測。本發(fā)明檢測靈敏度高、選擇性好、抗干擾能力強、可重現(xiàn)性好、操作簡便。