本發(fā)明揭露一種PCR擴(kuò)增檢測方法,其包括如下步驟:(1)構(gòu)建PCR反應(yīng)體系,包括:Buffer溶液;dATP溶液;dCTP溶液;dGTP溶液;dTTP溶液;與檢測樣品互補(bǔ)的上游引物、下游引物與探針;雙熱啟動DNA聚合酶,由化學(xué)修飾熱啟動Taq酶和納米抗體封閉熱啟動Taq酶按照濃度1:1比例混合而成;(2)將PCR反應(yīng)體系與檢測樣品混合進(jìn)行PCR擴(kuò)增;(3)獲取PCR擴(kuò)增后的循環(huán)閾值,并根據(jù)循環(huán)閾值確認(rèn)所述檢測樣品的待檢測物的量。選用納米抗體制備熱啟動Taq聚合酶形成雙熱啟動DNA聚合酶,不僅可以模擬聚合酶單克隆抗體應(yīng)用于熱啟動PCR,還能夠在功能上取代穩(wěn)定性差的單克隆抗體,并且大大降低了制備成本。
聲明:
“含有納米抗體的雙熱啟動DNA聚合酶及PCR擴(kuò)增檢測方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)