本發(fā)明公開了一種中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白檢測試劑盒及其制備方法和使用方法；所述試劑盒內包括熒光素標記的NGAL抗體溶液、堿性磷酸酶標記的NGAL抗體溶液、包被熒光素抗體的磁微粒懸浮液、NGAL校準品和發(fā)光底物溶液；本發(fā)明的試劑盒將免疫磁微粒技術和化學發(fā)光技術相結合，提供了一種接近均相的反應體系，讓連接標記示蹤物的NGAL抗體與連接橋連物的NGAL抗體先與待檢測抗體反應，形成雙抗原夾心結構的復合物；由于在形成雙抗原夾心復合物的過程中，與標記抗原的都是小分子物質，其空間位阻遠遠小于磁性微球的空間位阻，能夠促進抗原?抗體結合反應充分進行，使得靈敏度、精密度、檢測范圍等檢測性能大大提高。