本發(fā)明提供了一種用于活細胞內(nèi)銅離子定點檢測的免洗熒光探針,該熒光探針化學結(jié)構(gòu)特征如下:熒光團母體是萘酰亞胺類染料,萘酰亞胺發(fā)色團母體的內(nèi)酰位點連接SNAP標簽蛋白的底物BG基團,4位氨基連接銅離子受體DPA,具體結(jié)構(gòu)如式(1)所示。該小分子熒光探針在嘌呤和DPA基團的淬滅作用下熒光微弱,其識別SNAP標簽蛋白并與其共價連接后熒光恢復,此時加入Cu
+離子熒光再次淬滅。通過基因工程方法將SNAP標簽蛋白與線粒體的COX8A融合在活細胞內(nèi)表達,利用該小分子熒光探針與SNAP標簽蛋白的專一識別進而定位在線粒體。通過熒光變化檢測線粒體Cu
+。由于標記前后熒光的變化,標記后不需要清洗的步驟即可以直接應用。
聲明:
“用于活細胞內(nèi)銅離子定點檢測的免洗熒光探針” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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