本發(fā)明涉及一種有效降低曼地亞紅豆杉(Taxus?x?media)細(xì)胞合成C-14位氧化紫杉烷(C-14?oxygenated?taxoids)的方法,屬于基因工程的技術(shù)領(lǐng)域,是通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的雙元載體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)將針對(duì)紅豆杉紫杉烷14β羥基化酶基因(簡(jiǎn)稱14OH)片段構(gòu)建的RNA干涉載體導(dǎo)入到曼地亞紅豆杉(Taxus?x?media)培養(yǎng)細(xì)胞中。利用優(yōu)化的轉(zhuǎn)化方法成功地獲得了轉(zhuǎn)基因細(xì)胞。PCR-Southern雜交、RT-PCR基因表達(dá)分析和化學(xué)成分檢測(cè)結(jié)果顯示:曼地亞紅豆杉細(xì)胞轉(zhuǎn)基因試驗(yàn)取得成功,轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系中14OH基因mRNA表達(dá)水平發(fā)生顯著地下降。本發(fā)明顯著抑制了曼地亞紅豆杉細(xì)胞向C-14位氧化紫杉烷的流向,有望使代謝流向包括抗癌藥物紫杉醇(taxol)和及其前體巴可亭III(baccatin?III)在內(nèi)的C-13位氧化紫杉烷(C-13oxygenated?taxoids),從而為提高紫杉醇的生物合成產(chǎn)量提供一條新方法。