本發(fā)明公開一種基于液態(tài)
芯片技術(shù)的PCR擴(kuò)增后恒溫雜交方法,包括:1)用標(biāo)記引物和普通引物擴(kuò)增待測核酸序列,標(biāo)記的引物的加入量大于普通引物,擴(kuò)增后產(chǎn)生大量帶有標(biāo)記的單鏈DNA序列和少量雙鏈DNA序列;2)將單鏈DNA探針采用功能基團(tuán)通過化學(xué)反應(yīng)生成共價鍵的方式連接到帶有編碼功能的微球上;3)將步驟1)中擴(kuò)增的標(biāo)記的單鏈和雙鏈靶標(biāo)核酸混合擴(kuò)增產(chǎn)物與2)中連接探針的帶有編碼功能的微球混合后,恒溫雜交;4)將步驟3)中的雜交產(chǎn)物中加入顯色劑,恒溫孵育;5)將步驟4)中的孵育產(chǎn)物采用流式細(xì)胞分析儀分析結(jié)果。本發(fā)明較現(xiàn)有的雜交方法減少了高溫變性的過程,全程雜交不需要變溫,簡化了實驗的操作,實驗操作的安全性更高。
聲明:
“基于液態(tài)芯片技術(shù)的PCR擴(kuò)增后恒溫雜交方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)