本發(fā)明公開了一種絕對定量細(xì)胞內(nèi)DNA雙鏈斷裂數(shù)量的方法及應(yīng)用。該方法將帶有末端修飾的外源核苷酸片段插入至固定細(xì)胞基因組DNA雙鏈斷裂處,然后將基因組片段化并連接銜接接頭,針對外源核苷酸片段和銜接接頭設(shè)計(jì)特異性PCR引物和特異性熒光探針,結(jié)合細(xì)胞內(nèi)參基因,構(gòu)建數(shù)字液滴PCR體系,定量細(xì)胞內(nèi)DNA雙鏈斷裂數(shù)量。本發(fā)明使得檢測DNA雙鏈斷裂擺脫了序列依賴性,廣泛適用于絕對精準(zhǔn)定量動植物內(nèi)因疾病、輻射、藥物或者基因編輯等各種原因造成的DNA雙鏈斷裂數(shù)量,可用作檢測射線損傷、化學(xué)藥物損傷、基因編輯脫靶效率等問題的有效工具,在分子生物學(xué)和臨床診斷中具有非常廣闊的應(yīng)用前景。
聲明:
“絕對定量細(xì)胞內(nèi)DNA雙鏈斷裂數(shù)量的方法及應(yīng)用” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)