本發(fā)明公開了一種固定化載體及其制備方法和固定化β-葡萄糖苷酶。所述固定化載體，包括磁性納米顆粒、富羧基復(fù)合材料以及過渡金屬離子；富羧基復(fù)合材料包裹在磁性納米顆粒表面形成富羧基殼，其表面羧基與過渡金屬離子絡(luò)合，過渡金屬離子與待固定化的酶通過金屬離子配位鍵結(jié)合。所述制備方法，包括步驟：（1）制備磁性納米顆粒；（2）對所述顆粒進(jìn)行羥基功能化修飾；（3）對所述顆粒進(jìn)行環(huán)氧基功能化修飾；（4）對所述顆粒進(jìn)行羧基功能化修飾；（5）對所述顆粒進(jìn)行過渡金屬離子絡(luò)合。所述固定化的β-葡萄糖苷酶，將所述功能化載體和β-葡萄糖苷酶通過金屬配位鍵結(jié)合。本發(fā)明生物酶結(jié)合牢固，酶活高，操作穩(wěn)定性強，適合大規(guī)模生產(chǎn)。