本發(fā)明提供高靈敏度的化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒及其制備方法和應(yīng)用，具體涉及臨床免疫分析技術(shù)領(lǐng)域，包括直接包被捕獲分子的固相載體、生物素標(biāo)記的標(biāo)記分子以及發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記的鏈霉親合素，所述標(biāo)記分子能夠與待測(cè)樣本中的目標(biāo)分析物結(jié)合且所述捕獲分子能夠與待測(cè)樣本中的目標(biāo)分析物特異性結(jié)合或者為待測(cè)樣本中的目標(biāo)分析物類似物；或者所述標(biāo)記分子能夠與待測(cè)樣本中的目標(biāo)分析物競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合且捕獲分子能夠與待測(cè)樣本中的目標(biāo)分析物特異性結(jié)合。本發(fā)明基于鏈霉親和素在結(jié)構(gòu)特性，每摩爾的四聚體分子可結(jié)合四摩爾的生物素分子，并且兩者之間具有極強(qiáng)的親和力，構(gòu)建一個(gè)循環(huán)放大的反應(yīng)過程，實(shí)現(xiàn)了信號(hào)的放大而提高了靈敏度。