一種用于評(píng)價(jià)環(huán)境樣品毒性的方法，包括步驟：a)將水性緩沖液與酶碳酸酐酶的水溶液混合；b)將包含二氧化碳(CO2)或碳酸氫鹽(HCO3-)的水溶液添加至步驟(a)中獲得的混合物以開始碳酸酐酶酶反應(yīng)；c)通過評(píng)價(jià)在步驟(b)中獲得的混合物隨時(shí)間的pH變化測(cè)定碳酸酐酶的酶活性，所述pH變化是由碳酸酐酶催化的CO2的水合反應(yīng)或HCO3-的反向脫水反應(yīng)的指示物；d)在其中沒有添加碳酸酐酶水溶液的步驟(a)的緩沖液上重復(fù)步驟(b)和(c)的步驟以測(cè)量非特異活性；e)在步驟(a)獲得的混合物上重復(fù)步驟(b)和(c)的步驟，其中，溶液包含已經(jīng)與待評(píng)價(jià)其毒性的環(huán)境樣品提前預(yù)孵育的碳酸酐酶；f)計(jì)算碳酸酐酶的抑制值(I)作為(i)和(ii)之間的百分比，其中，(i)是在步驟(e)中測(cè)得的碳酸酐酶的酶活性與在步驟(d)中測(cè)得的非特異活性之間的差值，以及(ii)是在步驟(c)中測(cè)得的碳酸酐酶的酶活性與在步驟(d)中測(cè)得的非特異活性之間的差值。本發(fā)明還涉及用于進(jìn)行本文中所描述的方法的試劑盒，包括以下組分：水性緩沖液；包含碳酸酐酶的水溶液；包含二氧化碳(CO2)或碳酸氫鹽(HCO3-)的水溶液；以及用于測(cè)量pH變化的裝置。