本發(fā)明公開了一種油田化學(xué)劑生物毒性評(píng)價(jià)方法，包括如下內(nèi)容：（1）發(fā)光菌復(fù)蘇：將發(fā)光菌用氯化鈉溶液配制成菌懸液，于冰水浴中復(fù)蘇；（2）同步化培養(yǎng)：將復(fù)蘇菌懸液接種于活化培養(yǎng)基中，進(jìn)行活化培養(yǎng)；活化培養(yǎng)后期，在菌體培養(yǎng)液中加入生長(zhǎng)抑制劑，進(jìn)行同步培養(yǎng)；經(jīng)同步培養(yǎng)后，收集菌體細(xì)胞；（3）毒性評(píng)價(jià)：用氯化鈉溶液將菌體細(xì)胞配制成具有一定發(fā)光量的菌懸液，并添加發(fā)光促進(jìn)劑，用于毒性評(píng)價(jià)分析。本發(fā)明方法通過菌種復(fù)蘇、同步化培養(yǎng)、穩(wěn)態(tài)篩選等方式獲得具有較高發(fā)光穩(wěn)定性的供試發(fā)光菌；在毒性檢測(cè)過程中，加入發(fā)光促進(jìn)劑，從而削弱了個(gè)體發(fā)光差異，保證了毒性評(píng)價(jià)結(jié)果的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。