本發(fā)明涉及化學(xué)藥物分析方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種6?氯?3?甲基尿嘧啶及其有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法和應(yīng)用。6?氯?3?甲基尿嘧啶及其有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，包括如下步驟：采用高效液相色譜對(duì)供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)；所述高效液相色譜的檢測(cè)條件包括：檢測(cè)波長為205～215nm；采用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，所述流動(dòng)相包括體積比為5﹕95～15﹕85的流動(dòng)相A和流動(dòng)相B，所述流動(dòng)相A為乙腈，所述流動(dòng)相B為磷酸水溶液；所述磷酸水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05％～0.3％。本發(fā)明的檢測(cè)方法，可實(shí)現(xiàn)一次性高效的分離6?氯?3?甲基尿嘧啶及其有關(guān)物質(zhì)，專屬性強(qiáng)，耐用性好，可用于6?氯?3?甲基尿嘧啶的研究及質(zhì)量控制。