本發(fā)明公開了一種去泛素化酶的活性檢測方法,包括以下步驟:S1、將去泛素化酶,底物和反應緩沖液置于冰上解凍,將熒光素檢測試劑置于室溫,避光;S2、配制含有10mM?DTT的1X反應緩沖液,并以含有10mM?DTT的1X反應緩沖液分別配制去泛素化酶工作溶液與底物工作溶液;與傳統(tǒng)熒光分析法相比,本發(fā)明中的化學發(fā)光方法表現(xiàn)出更寬的線性范圍,更高的靈敏度和更低的檢測限,因此能獲得更高可靠性的檢測數(shù)據(jù);在獲得同等結(jié)果的前提下,通過氨基熒光素標記泛素(Ub?AML)作為發(fā)光底物所需要的酶量,低于傳統(tǒng)熒光法所需酶量幾百甚至幾千倍,從而極大的降低了高通量藥物篩選的成本。
聲明:
“去泛素化酶的活性檢測方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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