本發(fā)明涉及一種基于3D DNA納米網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)雙信號放大技術(shù)的microRNA檢測方法，本發(fā)明基于靶標(biāo)自循環(huán)的催化發(fā)卡自組裝與3D DNA納米網(wǎng)結(jié)構(gòu)的整合，構(gòu)建了一個雙信號放大技術(shù)的電化學(xué)生物傳感器。設(shè)計的兩個發(fā)卡序列一旦被靶標(biāo)啟動，即可形成熱力學(xué)穩(wěn)定的雜交雙鏈體結(jié)構(gòu)，同時釋放靶標(biāo)進(jìn)入下一個循環(huán)。該過程成功將靶標(biāo)轉(zhuǎn)換為更加穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，從而達(dá)到第一次信號放大的目的。隨后引入了一個3D DNA納米網(wǎng)結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)由三條DNA序列雜交形成的X型DNA結(jié)構(gòu)通過T4連接酶連接而成。3D DNA納米網(wǎng)結(jié)構(gòu)可與上述反應(yīng)形成的雙鏈體結(jié)構(gòu)雜交，從而實現(xiàn)第二次信號放大。具有檢測靈敏度高、檢測特異性好等優(yōu)點。