本發(fā)明公開了基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因物種的方法,該方法利用可特異性連接環(huán)化的寡核苷酸鏈作為探針與轉(zhuǎn)基因物種的靶基因雜交后在DNA連接酶的作用下形成環(huán)化單鏈探針,該探針在恒溫條件下被生物素復(fù)制引物滾動復(fù)制和支鏈擴(kuò)增,產(chǎn)生含有多個串連重復(fù)片段的生物素化滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物,擴(kuò)增產(chǎn)物與釕標(biāo)記的DNA探針雜交,再通過鏈霉親和素包被的磁珠分離、
電化學(xué)發(fā)光檢測,判斷轉(zhuǎn)基因的有無。本發(fā)明的滾環(huán)擴(kuò)增檢測方法中所擴(kuò)增的基因并不是轉(zhuǎn)基因物種的原基因序列而是探針序列,轉(zhuǎn)基因物種的原基因只是提供了一個探針環(huán)化的互補(bǔ)支架,保證了擴(kuò)增的安全性和特異性;另外所有的擴(kuò)增過程都可在恒溫下完成,無需PCR儀,降低了對實驗硬件的要求。
聲明:
“基于滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因物種的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)