本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種卡泊三醇中間體L及其潛在基因毒性雜質(zhì)的分離與測定方法，所述的方法是采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，進(jìn)樣，然后采用流動相進(jìn)行洗脫分離，具體為取中間體L及潛在基因毒性雜質(zhì)對照品及待測品分別制備成對照品溶液和供試品溶液，進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，比較供試品溶液與對照品溶液中對應(yīng)出峰時(shí)間的雜質(zhì)的峰面積，實(shí)現(xiàn)中間體L及潛在基因毒性雜質(zhì)的有效分離與檢測，操作簡單，準(zhǔn)確度高。