本發(fā)明公開一種應(yīng)用于蛋白質(zhì)組樣品制備的迷你蛋白反應(yīng)器及其應(yīng)用，涉及分析化學(xué)領(lǐng)域。該迷你蛋白反應(yīng)器主要由固定化金屬螯合層析IMAC磁珠和C18beads組成。預(yù)計將從不到10μL血清作為樣本進(jìn)行蛋白質(zhì)組概況分析，并可能用于轉(zhuǎn)化研究。此方法采用串聯(lián)柱分離技術(shù)實現(xiàn)了蛋白質(zhì)組學(xué)中復(fù)雜的樣品制備步驟，包括磷酸化蛋白質(zhì)預(yù)濃縮，還原，烷基化和消化，以及脫鹽和分餾。本發(fā)明的方法易于使用、耗時短(<2小時)，高通量，靈敏度高(可檢測>100個磷酸化蛋白質(zhì))、重復(fù)性良好(R>0.99)；是一種無論從數(shù)量還是從種類上，挖掘到最多蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)的有效方法，推測其可應(yīng)用于非標(biāo)記定量磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)轉(zhuǎn)化研究。