本發(fā)明公開了一種DNA-AuNPs納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的制備方法及應(yīng)用，包括Au?NPs的制備、DNA功能化Au?NPs的制備和DNA-AuNPs納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的層層組裝；本發(fā)明利用DNA-AuNPs做納米信標(biāo)，利用DNA的互補(bǔ)特性形成雙鏈DNA，進(jìn)而形成納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，有利于RuHeX這種電活性物質(zhì)的吸附；而利用DNA的互補(bǔ)的性能形成DNA-Au?NPs的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，為電活性物質(zhì)的吸附提供了大量的位點，從而實現(xiàn)電化學(xué)信號的放大，用于蛋白激酶活性及其抑制劑分析，通過鋯離子的配位作用，利于納米網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)修飾在電極表面，為活性物質(zhì)提供了大量的負(fù)載位點，極大增強(qiáng)了電化學(xué)信號，因此，該生物傳感器對激酶活性的最低檢測限值達(dá)到0.03U/mL，同時穩(wěn)定性高、線性范圍寬。