本發(fā)明屬于動(dòng)物育種學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種Nanos2在雞ESCs向雄性生殖細(xì)胞分化過(guò)程中功能驗(yàn)證的方法，包括Nanos2在雞不同組織中的表達(dá)量檢測(cè)、Nanos2克隆與pcDNA3.0?Nanos2載體的構(gòu)建、Nanos2敲除載體構(gòu)建及敲除活性驗(yàn)證、體外Nanos2功能驗(yàn)證、體內(nèi)Nanos2功能驗(yàn)證、Quantitative?Real?Time?PCR(quantitative?RT?PCR)驗(yàn)證、細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及細(xì)胞免疫化學(xué)檢測(cè)、流式細(xì)胞分析、石蠟切片及PAS染色。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，能夠較快地在雞生殖細(xì)胞水平完成Nanos2的功能驗(yàn)證。方法簡(jiǎn)單易行，可重復(fù)性強(qiáng)，在普通實(shí)驗(yàn)室即可進(jìn)行。該方法大大提高了體外誘導(dǎo)雞ESCs向雄性生殖細(xì)胞分化的效率。該方法大大提高了體內(nèi)誘導(dǎo)雞PGCs和SSCs的生成效率。