本發(fā)明公開(kāi)了一種用于葡萄糖傳感器的融合蛋白的制備方法,其步驟是:首先合成編碼聚賴氨酸的DNA鏈,將合成的DNA鏈在65℃褪火形成雙鏈的短DNA片段;其次是通過(guò)基因拼接,構(gòu)建融合蛋白的表達(dá)載體pPICGLT;第三是表達(dá)載體pPICGLT經(jīng)限制性內(nèi)切酶StuⅠ線性化后,用原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化進(jìn)酵母中;第四是酵母重組子的篩選,提取酵母的基因組DNA作檢測(cè);第五是融合蛋白的表達(dá)、純化,轉(zhuǎn)化子在30℃下MM培養(yǎng)基中培養(yǎng)72小時(shí),每24小時(shí)加一次甲醇;第六是融合蛋白與介體的連接;第七是葡萄糖傳感器的制備;第八是
電化學(xué)檢測(cè)。本發(fā)明制備葡萄糖傳感器測(cè)量線性范圍寬,可達(dá)45mmol/L,且響應(yīng)信號(hào)大,保存期長(zhǎng)。
聲明:
“用于葡萄糖傳感器的融合蛋白的制備方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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