一種高效表達(dá)與制備外分泌型人源AFP的方法,該方法主要包括如下三個方面的內(nèi)容:(1)利用基因合成技術(shù)合成AFP的DNA序列,再采用基因克隆和分子生物學(xué)方法構(gòu)建酵母重組表達(dá)質(zhì)粒PpICZ?α?A-AFP,并進(jìn)行質(zhì)粒抽提;(2)使用畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)體外誘導(dǎo)表達(dá)分泌型AFP重組蛋白,并通過優(yōu)化表達(dá)時間、誘導(dǎo)劑添加量等條件得出最佳誘導(dǎo)條件;(3)優(yōu)化硫酸銨分級沉淀,從發(fā)酵液上清中分離純化得到分泌到胞外的AFP重組蛋白,在55%硫酸銨濃度下目的蛋白AFP幾乎全部析出,且純度高達(dá)98.844%;本發(fā)明將純化得到的分泌重組蛋白AFP用臨床檢測
電化學(xué)發(fā)光法檢測其生物活性,其值達(dá)3500ng/mL。
聲明:
“高效表達(dá)與制備外分泌型人源AFP的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)