本發(fā)明公開了一種識別HIV-1受體結(jié)合表位的可溶性單鏈抗體的制備方法,采用化學合成的方法獲得b12抗體重鏈和輕鏈的可變區(qū),用重疊PCR方法拼接得到scFv基因,利用原核表達系統(tǒng),在室溫和IPTG終濃度為0.5mM的條件下,誘導表達的b12-scFv大約有70%以可溶性蛋白的形式存在,用鎳柱一步純化便可獲得高純度的可溶性scFv,從1L培養(yǎng)液中能獲得約2mg純化的可溶性蛋白。本發(fā)明獲得的b12單鏈抗體可溶性好,表達量尚佳,純化過程簡單,抗原結(jié)合能力好。用基因工程的方法在體外大量制備該抗體,可用于艾滋病的被動免疫防治;在基于包膜蛋白的HIV-1重組疫苗的設計中,也可用于b12抗原表位的檢測,在HIV-1的被動免疫治療和免疫原檢測中具有一定的應用前景。
聲明:
“識別HIV-1受體結(jié)合表位的可溶性單鏈抗體的制備方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術所有人。
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