本發(fā)明公開了一種L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體的高通量快速篩選方法,屬于生物化學(xué)和酶工程領(lǐng)域。本發(fā)明取乙醛及乙醇脫氫酶反應(yīng)液,隨即置于酶標(biāo)儀中檢測(cè)OD
340nm隨時(shí)間的變化情況,計(jì)算OD
340nm下降的平均反應(yīng)速率V
OD340nm,以乙醛濃度為自變量x,V
OD340nm為因變量y,得到回歸方程y=ax,以及乙醛標(biāo)準(zhǔn)曲線。轉(zhuǎn)醛反應(yīng)液、L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體全細(xì)胞反應(yīng)液,充分混勻反應(yīng)結(jié)束后,離心除去細(xì)胞沉淀,取上清液和乙醇脫氫酶反應(yīng)液,隨即置于酶標(biāo)儀中檢測(cè)OD
340nm隨時(shí)間的變化情況,計(jì)算OD
340nm下降的平均速率V
OD340nm;通過V
OD340nm計(jì)算得到反應(yīng)液中乙醛的濃度,以乙醛濃度的高低來篩選L?蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體。本發(fā)明不受反應(yīng)液中的雜質(zhì)干擾,靈敏度和準(zhǔn)確性高,重復(fù)性好,操作簡(jiǎn)便,便于推廣應(yīng)用。
聲明:
“L-蘇氨酸轉(zhuǎn)醛酶突變體的高通量快速篩選方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)