本發(fā)明公開了一種豬誘導性多能干細胞誘導方法,利用外源限定因子與增強型綠色熒光蛋白(Enhanced?green?fluorescent?protein,EGFP)報告基因構(gòu)建融合蛋白慢病毒表達載體用于豬誘導性多能干細胞的誘導,對表達外源限定因子融合蛋白的豬胎兒成纖維細胞進行培養(yǎng)傳代,逐步分離培養(yǎng)出集落邊緣界限清晰的細胞克隆,細胞集落生長狀態(tài)穩(wěn)定,核型正常,堿性磷酸酶檢測為陽性,免疫細胞化學檢測顯示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表達為陽性,體內(nèi)能夠分化形成含有三個胚層的畸胎瘤,分離培養(yǎng)的細胞克隆得到豬誘導性多能干細胞。
聲明:
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