本發(fā)明公開(kāi)了Click?iG:一種多類(lèi)型完整糖肽的鑒定方法,具體是利用非天然糖代謝標(biāo)記技術(shù),在細(xì)胞或活體組織樣品中多種類(lèi)型糖基化修飾蛋白的聚糖鏈上引入一個(gè)疊氮基團(tuán),然后通過(guò)生物正交的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng),使糖蛋白的聚糖鏈上連接有生物素基團(tuán)標(biāo)簽,隨后將蛋白酶解為肽段,再通過(guò)鏈霉親和素?生物素相互作用對(duì)糖基化修飾肽段進(jìn)行富集,最后通過(guò)基于sceHCDpdEThcD碎裂技術(shù)的靜電軌道離子阱高分辨質(zhì)譜進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,并使用pGlyco3軟件進(jìn)行搜庫(kù)分析。所述的方法流程具有鑒定糖基化修飾種類(lèi)多、修飾位點(diǎn)信息與糖鏈組成信息完全、鑒定覆蓋度高等優(yōu)點(diǎn),可以對(duì)復(fù)雜生物樣品的N?糖基化、黏蛋白型O?糖基化和O?GlcNAc糖基化完整糖肽進(jìn)行統(tǒng)一鑒定,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)同一樣品中多類(lèi)型糖基化修飾組學(xué)的綜合研究。
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