本發(fā)明涉及藥物化學領(lǐng)域,具體公開了利用FDH酶聯(lián)熒光原理和AlphaScreen技術(shù)分別篩選ALKBH5小分子抑制劑的方法。該方法先成功構(gòu)建并原核表達純化得到純度較高的ALKBH5重組蛋白,合成m6A修飾的ssRNA作為底物。用FDH酶聯(lián)熒光原理和AlphaScreen技術(shù)檢測ALKBH5的活性并建立其小分子抑制劑篩選平臺。FDH酶聯(lián)熒光反應體系穩(wěn)定,所用試劑便宜,易得,背景低;AlphaScreen反應體系穩(wěn)定,受到樣品的干擾非常少,假陽性假陰性均低,可去除天然產(chǎn)物自發(fā)熒光的干擾,靈敏度高;這兩種方法均易于實現(xiàn)微型化,通量高且相互補充,可實現(xiàn)ALKBH5小分子抑制劑的篩選。
聲明:
“高通量篩選ALKBH5小分子抑制劑的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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