本發(fā)明提供了一種檢測(cè)活體植物細(xì)胞中兩種膜蛋白共定位程度的方法。具體步驟為：(1)使植物中共表達(dá)如下兩種融合蛋白，以獲得對(duì)待測(cè)兩種蛋白進(jìn)行了雙色標(biāo)記的植物材料：熒光蛋白A標(biāo)記的待測(cè)蛋白A，熒光蛋白B標(biāo)記的待測(cè)蛋白B，熒光蛋白A與熒光蛋白B發(fā)不同顏色的熒光；(2)用可變角全內(nèi)反射熒光顯微鏡對(duì)待測(cè)植物材料進(jìn)行觀察，獲得雙通道圖像；(3)用ImageJ軟件將所得雙通道圖像保存為無(wú)損壓縮的TIFF格式，然后在PPA軟件中對(duì)兩個(gè)圖像進(jìn)行校準(zhǔn)，再用中值濾波對(duì)圖像進(jìn)行去背景處理，最后通過(guò)雙高斯擬合計(jì)算待測(cè)蛋白A和待測(cè)蛋白B的接近指數(shù)，從而得到待測(cè)蛋白A和待測(cè)蛋白B的共定位程度。本發(fā)明獲得兩種膜蛋白共定位程度的方法簡(jiǎn)單、重復(fù)性好，避免了細(xì)胞內(nèi)部熒光信號(hào)的干擾，并且獲得的數(shù)值具有明確的生物學(xué)意義。