本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種人蛻膜MDSCs的分離方法,該分離方法包括步驟:蛻膜組織采集、蛻膜組織進(jìn)一步清洗、剪碎、消化、終止消化、過濾、單個(gè)核細(xì)胞獲得、細(xì)胞貼壁、收集未貼壁細(xì)胞、MDSCs分離和流式檢測(cè)。本發(fā)明使用較溫和的Ⅳ型膠原酶進(jìn)行原代消化分離,與胰酶相比,膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用,避免了胰酶消化時(shí)對(duì)細(xì)胞膜蛋白的破壞作用;消化過程中加入I型DNA酶防止DNA導(dǎo)致的細(xì)胞凝集,且對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷;通過使用CD33磁珠分選獲得高純度的CD33+MDSCs,與流式分選相比,磁珠分選可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量高純度的細(xì)胞,操作簡(jiǎn)單,避免長(zhǎng)時(shí)間操作對(duì)細(xì)胞活性的影響和污染幾率的增加。
聲明:
“人蛻膜MDSCs的分離方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)