本發(fā)明涉及一種無(wú)血清無(wú)飼養(yǎng)層的胚胎干細(xì)胞或多能干細(xì)胞培養(yǎng)基及其應(yīng)用，所述無(wú)血清無(wú)飼養(yǎng)層的胚胎干細(xì)胞或多能干細(xì)胞培養(yǎng)基包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑，所述添加劑包括肝素鈉、哌啶酸、γ?氨基丁酸和鋰離子鹽。其是一種完全無(wú)異源(Xeno?free)的培養(yǎng)體系，不會(huì)帶來(lái)外源污染；培養(yǎng)基中的bFGF濃度可以被顯著地降低，因而使培養(yǎng)基的制備成本顯著降低，同時(shí)有效減少了bFGF的聚集現(xiàn)象，穩(wěn)定性提高，使培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞或多能干細(xì)胞的質(zhì)量維持穩(wěn)定，能夠長(zhǎng)時(shí)間維持胚胎干細(xì)胞或多能干細(xì)胞的未分化狀態(tài)和多能性；另外，哌啶酸、γ?氨基丁酸和鋰離子鹽三種物質(zhì)在促進(jìn)胚胎干細(xì)胞或多能干細(xì)胞的生存、增殖、維持連續(xù)傳代中具有難以預(yù)料的協(xié)同增效作用。